伊紅Y染料是常規病理組織切片染色中胞漿較理想的染色劑。組織切片染色的優良,對腫瘤的診斷有著重要的意義。伊紅染料雖常規配方較多,但在操作及染色效果等方面不夠理想,為此,我們對伊紅Y染色液配制進行了改進。改進后的方法具有操作簡便、經濟、染色性質穩定、著色力強且持久、顏色鮮艷等優點,特介紹如下。
A、 制:伊紅Y1G,蒸餾水90ML,苦味酸飽和水溶液10ML。將蒸餾水加入伊紅,待其全部溶解后,加入苦味酸飽和水溶液。
B、 色結果觀察:染色時間0.5-1分鐘。伊紅所著的顏色鮮艷,層次分明,與藍色的細胞核對比突出。
C、 討論:伊紅Y(四嗅熒光素二鈉鹽,分子式:C20-H6O5Br4NO2)是一種酸性紅色胞漿性染料,室溫下,在水中的溶解度度遠大于在酒精中的溶解度。它在溶液反應中,由于鈉離子的存在而呈堿性狀態。苦味酸[分子式:(NO2)3C6HOH]是一種較強的酸性染料,它的顏色是由硝基發色團所致,染色性能是由羥基助色團產生的。苦味酸具有三種作用:1本身是一種胞漿染料,具有染色作用。2又是一種酸,加入伊紅Y染色液中,使染色造成比胞漿等電點略為酸性的環境,抑制了部分氨基酸中羥基官能團,從而使氨基酸中氨基官能團和酸性染料結合,增加了染液與組織間的親和力,起到促染作用。3苦味酸又是一種氧化劑,在染色體中經過氧化物作用后,使染色劑與組織成份結合的更牢固。組織著色鮮艷,染色后不易褪色,因而切片可長期保存。
在常規配方中,有的染色效果好,但操作較繁瑣,且消耗較多試劑。有的操作簡單,但染色時間長,染液有效期短,常需加入冰醋酸,但加入劑量不易掌握,量少達不到促染作用,加入過多染液易沉淀,且引起色調不正,特別是容易褪色,染色結果不能長期保存。改進后的方法克服了以上缺點。另外,染液可隨用或配制后備用。經1年多的實踐該方法較為理想,具有推廣價值。